人酶聯(lián)免疫試劑盒（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）是一種常用的免疫檢測方法，用于檢測樣本中特定蛋白質(zhì)的存在和濃度。該試劑盒由多個(gè)試劑組成，包括固相酶標(biāo)板、抗體、酶標(biāo)記抗體和底物等。

ELISA試劑盒的工作原理基于抗原-抗體反應(yīng)，具體步驟如下：

1. 固相酶標(biāo)板涂層：將待檢測的抗原或抗體涂覆在酶標(biāo)板的孔中，使之與酶標(biāo)抗體結(jié)合形成固相。

2. 樣本處理：將樣本加入涂有抗原或抗體的酶標(biāo)板孔中，使樣本中的目標(biāo)物與固相抗原或抗體結(jié)合。

3. 第一次抗體結(jié)合：加入一種與目標(biāo)物結(jié)合的第一次抗體，與酶標(biāo)板孔中的抗原或抗體結(jié)合形成夾心復(fù)合物。

4. 第二次抗體結(jié)合：加入酶標(biāo)記的第二次抗體，該抗體能夠與第一次抗體結(jié)合。這種酶標(biāo)記抗體通常是酶標(biāo)的蛋白A或蛋白G。

5. 反應(yīng)底物：加入染色底物，使酶催化產(chǎn)生可定量檢測的顏色反應(yīng)。通常使用的酶有辣根過氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AP）。

6. 反應(yīng)終止：加入反應(yīng)終止劑，阻斷底物的反應(yīng)，停止顏色的形成。

7. 結(jié)果測定：通過測量底物反應(yīng)產(chǎn)生的顏色的光密度，使用光譜計(jì)或酶標(biāo)儀測定反應(yīng)的強(qiáng)度。

ELISA試劑盒應(yīng)用廣泛，可以檢測多種樣本，包括血清、血漿、尿液、唾液等。ELISA技術(shù)在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、生物制藥和食品安全等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，用于診斷疾病、監(jiān)測藥物療效、篩查新藥、檢測食品中的污染物等。

通過ELISA試劑盒，可以快速、準(zhǔn)確地檢測目標(biāo)物的存在和濃度，具有操作簡便、容易標(biāo)準(zhǔn)化、成本低等優(yōu)點(diǎn)，因此被廣泛應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室和臨床研究中。