近年來(lái)，隨著抗體藥物不斷應(yīng)用于更多治療領(lǐng)域，抗體藥物的治療機(jī)理變得更為復(fù)雜，同時(shí)抗體藥物的結(jié)構(gòu)也變得更為多樣化。納米抗體(nanobodies，Nbs)因具有較小的相對(duì)分子質(zhì)量，其分子結(jié)構(gòu)使其適用于疾病診斷治療等諸多領(lǐng)域，當(dāng)前得到了廣泛的關(guān)注。
 

　　納米抗體制備特點(diǎn)：
 

　　與常規(guī)單克隆抗體的VH折疊結(jié)構(gòu)相似，納米抗體的晶體和水溶性結(jié)構(gòu)兩個(gè)β片層組成支架。VHH的CDR3區(qū)較長(zhǎng)，人和小鼠抗體VH的CDR3區(qū)平均長(zhǎng)度為9-12個(gè)氨基酸，VHH的CDR3區(qū)為16-18個(gè)氨基酸。可變區(qū)的擴(kuò)大能夠形成更豐富的抗原結(jié)合構(gòu)象，在一定程度上彌補(bǔ)了輕鏈缺失導(dǎo)致結(jié)合力下降的不足，從而使得納米抗體本身具有較強(qiáng)的抗原結(jié)合能力。納米抗體的CDR3區(qū)可形成一個(gè)特殊的凸環(huán)，凸環(huán)大部分折疊在FR2上，這里疏水殘基受到保護(hù)，可避免與外界水環(huán)境接觸。凸環(huán)中的半胱氨酸與CDR1(或FR2)區(qū)的半胱氨酸形成二硫鍵從而使其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。該凸環(huán)結(jié)構(gòu)能夠結(jié)合酶的裂隙或是凹穴，因此能夠很好的成為酶的抑制劑、受體的激動(dòng)劑或拮抗劑。
 

　　在常規(guī)單克隆抗體VH的FR2區(qū)，有四個(gè)氨基酸參與了與VL的相互作用，這四個(gè)氨基酸分別為V37、G44、L45、W47。而在納米抗體VHH中，這四個(gè)氨基酸發(fā)生了突變，分別為F(Y)37、E44、R45、G47。這四個(gè)位點(diǎn)的變化不但使VHH保持了較好的特異性和親和性，還使其具有高親水性，從而能夠保持穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。
 

　　納米抗體VHH基因由VH家族的亞族III進(jìn)化而來(lái)，其豐富的基因序列多樣性使得重鏈抗體可形成大量不同結(jié)構(gòu)形式的凸環(huán)。人類VH3與駱駝VHH胚系基因具有高度的同源性，因此只需對(duì)VHH基因進(jìn)行較少的改變即可實(shí)現(xiàn)抗體人源化，通過(guò)基因工程技術(shù)獲得高親和力、高特異性、高穩(wěn)定性的納米抗體。
 

　　納米抗體制備的生化特性：可溶性高、耐受性強(qiáng)。納米抗體的FR2中四個(gè)位點(diǎn)的突變，使自身的溶解性增加，成藥性更好。納米抗體內(nèi)部的二硫鍵使其抗熱性和耐酸堿能力變得強(qiáng)。常規(guī)單克隆抗體穩(wěn)定性差，容易出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，并發(fā)生不可逆的熱聚合。而納米抗體在高溫環(huán)境中長(zhǎng)期放置仍然具有生物活性，并且在強(qiáng)變性劑條件下也表現(xiàn)出較高的耐受性。