技術(shù)服務(wù) 配體模擬激活性抗體制備

更新時(shí)間：2020-05-09

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技術(shù)簡(jiǎn)介

細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)是細(xì)胞功能組學(xué)研究的核心內(nèi)容。而受體配體結(jié)合啟動(dòng)細(xì)胞信號(hào)活動(dòng)是許多激活或抑制性信號(hào)通路關(guān)鍵的起始步驟。通過制備細(xì)胞表面信號(hào)受體的相關(guān)抗體，然后用抗體模擬受體的原配體細(xì)胞表面受體結(jié)合，從而啟動(dòng)細(xì)胞信號(hào)通路，這樣的抗體我們稱之為配體模擬激活性抗體。這其中經(jīng)典的例子莫過于一些在腫瘤靶向治療中使用的抗體藥物，目前，臨床上至少有11種單克隆抗體藥物被認(rèn)定為是以受體激活方式發(fā)揮功能的。

目前除了常規(guī)的兔、鼠多抗和鼠單抗雜交瘤細(xì)胞制備篩選方案，基于噬菌體展示技術(shù)，本公司目前還能夠?qū)崿F(xiàn)對(duì)新的受體激活抗體的發(fā)現(xiàn)，我們有常備的天然抗體庫(kù)，也可以根據(jù)特定抗原的信息，依托*的原核或真核蛋白表達(dá)技術(shù)，制備免疫后噬菌體庫(kù)，然后針對(duì)受體重組胞外區(qū)（ECD）進(jìn)行特異性抗體篩選。經(jīng)過噬菌體ELISA初篩的到的單鏈抗體，還可以進(jìn)一步進(jìn)行一些基于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的功能性篩選。公司目前已分離得到包括TNF受體超家族、CD28、CD40、PD1、CD137等在內(nèi)的配體模擬型激活性抗體。

服務(wù)組合

服務(wù)項(xiàng)目 (Service Items)		周期（周） Time(weeks)	免疫庫(kù) immunized library		天然庫(kù) naive library	雜交瘤制備篩選 Hybridoma Screening
多肽設(shè)計(jì)與合成 Peptide design & synthesis	多肽設(shè)計(jì) Peptide design	~2	可選，免費(fèi)
	多肽合成 Peptide synthesis		√			√
	小分子或多肽偶聯(lián) conjugation		√			√
蛋白制備 Proteins preparation	cDNA合成 cDNA synthesis	6~8		√			另議，時(shí)間與價(jià)格均不包含在以下信息中
	載體構(gòu)建 Vector construction			√			√
	蛋白表達(dá)與純化 Protein expression & purification			√			√
免疫階段 Immunization	免疫動(dòng)物 Immunized animals	~8	√			√
	ELISA檢測(cè) Elisa detection		√			√
細(xì)胞融合與篩選 Fusion & Screening		1.5				√
亞克隆階段 Subcloning		1				√
腹水生產(chǎn)（2只大鼠） Ascites production (Injection on 2 mice)		1				√
cDNA制備 cDNA preparation	逆轉(zhuǎn)錄制備cDNA文庫(kù) prepare cDNA library by RT-PCR	~1	√
	cDNA 文庫(kù)質(zhì)檢 cDNA library QC check		√
構(gòu)建Fab抗體庫(kù) Fab library construction	VH與VL基因獲得 obtained VH and VL genes	10~15	√
	構(gòu)建初級(jí)抗體庫(kù) primary antibody library construction		√
	構(gòu)建Fab抗體庫(kù) Fab library construction		√
噬菌體篩選 phage screening	噬菌體顆粒包裝 phage particles package	10~15	√		√
	磁珠親和篩選 magnetic beads affinity screening		√		√
	陽(yáng)性克隆回收基因測(cè)序 Recover positive clones and DNA sequencing		√		√
抗體表達(dá) Antibody expression	特異性雙鏈基因合成與Fc基因橋接 synthetic of target phage gene and Fc gene	~5	√		√
	構(gòu)建真核表達(dá)載體 Eukaryotic system expression plasmids construction		√		√
	真核表達(dá) Eukaryotic system expression		√		√
	穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞系構(gòu)建 Stably transfected cell line construction
純化與檢測(cè) Purification and detection	標(biāo)簽純化 Tag affinity purification	~1	√		√
	親和純化 Affinity purification					√
	特異性親和純化 Antigen specific affinity purification		√		√
總周期（月） Total lead time(months)			7~9

注：

價(jià)格面議；

請(qǐng)慎重考慮周期事宜，以上時(shí)間僅為理想條件下短周期；

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